梭菌检测

标准号：DB15/T 3438-2024

中国标准分类号：B41

发布日期：2024-05-31

国际标准分类号：65.020.30

实施日期：2024-07-01

技术归口：内蒙古畜牧业标准化技术委员会

代替标准：

主管部门：内蒙古自治区市场监督管理局

地方标准《产气荚膜梭菌分离与鉴定操作规程》，主管部门为内蒙古自治区市场监督管理局。本文件规定了羊产气荚膜梭菌分离与鉴定操作方法。本文件适用于实验室进行产气荚膜梭菌的分离鉴定。

标准号：T/NAIA 0264-2023

中国标准分类号：A031

发布日期：2023-12-18

国际标准分类号：65.020.30

实施日期：2023-12-31

团体名称：宁夏化学分析测试协会

本文件规定了羊场产气荚膜梭菌病诊断与防治技术规程的术语和定义、诊断、预防和治疗。本文件适用于羊场产气荚膜梭菌病的防治。其他羊场参照执行。

标准号：T/NAIA 0253-2023

中国标准分类号：A031

发布日期：2023-12-18

国际标准分类号：65.020.30

实施日期：2023-12-31

团体名称：宁夏化学分析测试协会

本文件规定了牛产气荚膜梭菌病的诊断与防控技术的术语和定义、诊断和防控措施。本文件适用于牛场产气荚膜梭菌病的综合防控。

标准号：T/NAASS 028-2022

中国标准分类号：A011

发布日期：2022-11-12

国际标准分类号：01.020

实施日期：2022-12-16

团体名称：宁夏回族自治区农学会

本文件规定了宁夏规模奶牛场牛魏氏梭菌病预防性消毒、综合诊断、预防接种与控制等技术要求本文件适用于宁夏规模奶牛场牛魏氏梭菌病的防控3　术语和定义下列术语和定义适用于本文件

3.1　牛魏氏梭菌病bovinebotulism是指由不同血清型的魏氏梭菌引发牛的一种急性、致死性传染病

4　预防性消毒4.1　消毒时机对规模奶牛场圈舍、场地、用具等进行每周至少一次消毒，以达到预防牛魏氏梭菌病的目的

4.2消毒剂的选择严格按消毒剂的使用说明来配制消毒液，宜现配现用，消毒药要定期更换，严禁酸碱消毒液混合使用

一般消毒剂均能杀死魏氏梭菌繁殖体，但其芽孢抵抗力很强，需使用高浓度高效消毒剂进行消毒，如20%漂白粉、3%-5%氢氧化钠

4.3消毒对象包括运动场、产房、采食区、挤奶台、生产区道路、犊牛岛、饮水台等区域

5　综合诊断5.1　现场诊断病牛不表现出任何前驱症状，急性发病，病程短促

一些病牛可表现出急卧急起，伴有腹痛、食欲不振或者废绝，反刍明显减弱，甚至完全停止；四肢乏力，行走摇晃或者呈卧地状，肌肉震颤，耳鼻端发凉，呼吸困难，最终倒地而发生死亡

根据急性死亡、病程急促和前述其他症状，可以现场初步诊断为该病

5.2　流行病学调查本病的病原体为梭菌属的产气荚膜梭菌

该细菌在自然界分布极广，是土壤性病原微生物的一种，其所产生的外毒素对疾病的发生与发展起到关键作用

奶牛对魏氏梭菌具有易感性，常表现为散发性，有较高的病死率，对奶牛养殖产生较大损失

病牛是主要传染源，可从粪便排出大量病原菌，从而污染外界环境并可以存活很长时间

本病常本病主要经过水平方式进行传播，病原菌可污染饲草料及饮水后经消化道感染健康牛

气候、饲养环境突然发生改变，或者突然更换饲料等，都会诱发本病

5.3　病理学诊断病死牛尸体外观以及营养状况良好，部分病例口鼻腔出现泡沫，混有血沫，肛门外翻带有血沫；肝脏、脾脏发生肿大，质地变脆易碎，有时伴有局灶性坏死；心脏、肺脏、肾脏及肠道发生不同程度的出血性炎症反应；全身淋巴结发生程度不同的肿大，有些伴有出血

5.4　细菌学诊断按NY/T541的规定采样，采用革兰氏染色镜检的方法，结合细菌学染色特性、细菌形态学等特点进行判断

在有条件的实验室，将所采集的主要脏器组织接种于肉肝汤，在厌氧条件下进行培养，再取培养物在绵羊鲜血琼脂平皿上接种培养，出现溶血环，然后挑取单个菌落用于纯培养，并进行染色镜检

纯培养物染色镜检，可发现呈革兰氏阳性粗大杆菌，少数形成芽孢

5.5　血清学诊断采用毒素抗毒素中和试验的方法，对可疑病例的样品处理后与已知的魏氏梭菌抗毒素混合后，将此混合物接种健康小鼠，经过24小时以上的观察期

根据试验小鼠的健活或死亡情况记录结果，以此判断是否存在魏氏梭菌感染及由何种血清型魏氏梭菌引发感染

5.6　分子生物学诊断对出现症状的可疑牛只，可采集粪样、脏器组织等，采用分子生物学PCR技术或实时荧光定量PCR技术进行检测与诊断，还可鉴别出魏氏梭菌的血清型

6　预防与控制6.1　预防措施6.1.1科学饲喂在保障良好的饲料原料品质的基础上，应科学制定日粮配方，保证日粮的全价性，提高奶牛抵抗力

避免持续饲喂富含蛋白、淀粉的日粮，减少奶牛魏氏梭菌病的诱发因素

6.1.2日常消毒奶牛场做好平时的预防消毒工作，并在间隔2～3个月后更换消毒剂

6.1.3预防接种结合奶牛魏氏梭菌病的发病特点及流行病学规律，规模奶牛场应于每年3月份及9月份实施牛梭菌病疫苗的免疫接种

接种途径及接种剂量等参照疫苗使用说明书

6.2　控制措施6.2.1随时消毒在规模奶牛场出现可疑病例或确诊病牛后，应对其停留过的场地、污染区域进行随时消毒，对其粪便及分泌物进行严格消毒处理

6.2.2紧急接种对发生并确诊牛魏氏梭菌病的牧场，应对健康及假定健康牛只采用与引发本次魏氏梭菌病血清型相一致的梭菌疫苗，进行计划外应急性接种

出现症状的牛只不予接种

6.2.3病死牛的无害化处理奶牛魏氏梭菌病可引发患牛的死亡

按照农业部农医发〔2017〕25号相关规定，病牛死亡后的尸体应由指定车辆运往无害化处理厂进行处置

病死牛尸体禁止解剖，肌肉组织及内脏下杂禁止食用、销售

标准号：T/SDAA 0046-2021

中国标准分类号：A039

发布日期：2021-11-30

国际标准分类号：65.020.30

实施日期：2021-12-31

团体名称：山东省畜牧协会

3原理根据产气荚膜梭菌能分泌α毒素和θ毒素使血琼脂培养基产生溶血现象，初步筛选可疑菌；根据产气荚膜梭菌为革兰氏阳性杆菌、α毒素能分解卵黄中的卵磷脂在卵黄琼脂培养基上产生卵磷脂酶乳白色浑浊圈和最为突出的生化特性：发酵牛乳中的乳糖使牛乳酸凝并产生大量气体使凝块破裂成多孔海绵状“暴裂发酵”现象，初步鉴定产气荚膜梭菌；根据本菌16srDNA基因序列设计一对特异性引物，以DNA核酸为模板扩增一段特异的目的基因片段，经琼脂糖凝胶电泳确定PCR产物大小为220bp，确定产气荚膜梭菌

标准号：T/CSWSL 006-2019

中国标准分类号：B46/A039

发布日期：2019-09-06

国际标准分类号：65.120

实施日期：2019-12-01

团体名称：北京生物饲料产业技术创新战略联盟

本标准适用于以丁酸梭菌为菌种，经发酵、精制等工艺加工制成的固态和液态饲料添加剂产品本标准规定了饲料添加剂丁酸梭菌的产品分类、技术要求、试验方法、检验规则、标志、标签、包装、运输、贮存及保质期

标准号：T/CPMA 008-2020

中国标准分类号：C59/Q843

发布日期：2020-07-01

国际标准分类号：11.020

实施日期：2020-10-01

团体名称：中华预防医学会

对艰难梭菌感染诊断所需的诊断依据、诊断原则、诊断和鉴别诊断进行明确规定

标准号：DB62/T 2522-2014

中国标准分类号：B41

发布日期：2014-11-12

国际标准分类号：11.220

实施日期：2014-12-10

技术归口：甘肃省农牧厅

代替标准：

主管部门：甘肃省质量技术监督局

地方标准《羊梭菌病防治技术规范》，主管部门为甘肃省质量技术监督局。本标准规定了“羊快疫”、“羊肠毒血症”、“羊猝疽”、“羊黑疫”和“羔羊痢疾”五种对养羊业危害严重的梭菌性疾病的诊断、预防和治疗方法。本标准适用于甘肃省境内从事养羊和动物诊疗单位对羊梭菌病的防治。

标准号：DB21/T 3698-2023

中国标准分类号：B46

发布日期：2023-02-28

国际标准分类号：65.120

实施日期：2023-03-28

技术归口：辽宁省农业农村厅

代替标准：

主管部门：辽宁省市场监督管理局

地方标准《饲用微生物制剂中丁酸梭菌的检测》由辽宁省农业农村厅归口上报，主管部门为辽宁省市场监督管理局。本文件规定了饲用微生物制剂中丁酸梭菌的检测方法。本文件适用于各种饲料添加剂各组分中丁酸梭菌的检测。

标准号：DB63/T 1053-2011

中国标准分类号：B41

发布日期：2011-12-19

国际标准分类号：11.220

实施日期：2012-02-01

技术归口：

代替标准：

主管部门：青海省质量技术监督局

地方标准《羊梭菌病防治技术规范》，主管部门为青海省质量技术监督局。

标准号：DB41/T 1728-2018

中国标准分类号：B20

发布日期：2018-11-26

国际标准分类号：65.120

实施日期：2019-02-26

技术归口：

代替标准：

主管部门：河南省质量技术监督局

地方标准《饲料添加剂丁酸梭菌的测定 微生物法》，主管部门为河南省质量技术监督局。

标准号：DB21/T 2734.2-2017

中国标准分类号：B41

发布日期：2017-02-23

国际标准分类号：11.220

实施日期：2017-03-23

技术归口：

代替标准：

主管部门：辽宁省质量技术监督局

地方标准《病菌PCR 分型诊断方法 第2 部分：产气荚膜梭菌PCR 分型检测方法》，主管部门为辽宁省质量技术监督局。

标准号：DB42/T 1864.3-2022

中国标准分类号：B41

发布日期：2022-04-25

国际标准分类号：11.220

实施日期：2022-06-25

技术归口：

代替标准：

主管部门：湖北省市场监督管理局

地方标准《家禽疫病诊断技术规程 第3部分：鸡沙门氏菌、产气荚膜梭菌和空肠弯曲菌三重荧光PCR检测方法》，主管部门为湖北省市场监督管理局。本文件规定了禽沙门氏菌、产气荚膜梭菌和空肠弯曲菌三重荧光PCR检测方法所需检测样品、仪器与设备、试剂与材料、检测步骤及结果判定。本文件适用于检测鸡肉及相关产品、鸡泄殖腔拭子和粪便中的沙门氏菌、产气英膜梭菌和空肠弯曲菌。

标准号：DB62/T 2522-2021

中国标准分类号：B41

发布日期：2021-08-04

国际标准分类号：65.020.40

实施日期：2021-09-04

技术归口：

代替标准：

主管部门：甘肃省市场监督管理局

地方标准《羊梭菌性疾病防治技术规范》，主管部门为甘肃省市场监督管理局。本文件规定了羊梭菌性疾病的诊断、预防和治疗。本文件适用于羊梭菌性疾病的防治。

标准号：DB53/T 1059.1-2021

中国标准分类号：B41

发布日期：2021-09-30

国际标准分类号：11.220

实施日期：2021-10-14

技术归口：

代替标准：

主管部门：云南省市场监督管理局

地方标准《滇金丝猴检疫技术 第1部分：产气荚膜梭菌实验室检测技术规范》，主管部门为云南省市场监督管理局。本文件规定了滇金丝猴(Rhinopithecusbieti)检疫技术中产气荚膜梭菌实验室检测技术的总则、产气荚膜梭菌分型、仪器设备和试剂、样品、试验步骤和试验数据处理。本文件适用于滇金丝猴检疫技术中产气荚膜梭菌实验室检测。