荧光探针检测

荧光探针检测简介

发布时间：2024-04-07 07:38:28

更新时间：2025-05-07 07:22:06

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第三方荧光探针检测机构北京中科光析科学技术研究所科研分析检测中心在荧光探针检测领域拥有多年检测经验。可进行环境水样、地下水、地表水、废水、生活饮用水、工业用水、医疗废水、农田灌溉水、水产养殖水、矿山废水、饮用酒水、水产品、农产品、食品、药品、化学品、化妆品、环境样品、水文水质评估、土壤样品等等荧光探针检测，作为综合性研究所，拥有相关检测资质，检测设备齐全，数据科学可靠，7-15个工作日便可出具荧光探针检测报告。

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荧光探针检测内容

检测项目（部分）

溶解氧浓度：测量样品中溶解在水中的氧气分子浓度，反映水体的氧气含量。

pH值：测量样品的酸碱性，用于判断水体的酸碱程度。

温度：测量样品的温度，用于探测水体的热量变化。

重金属离子浓度：测量样品中重金属离子（如铜、铅、镉等）的含量，用于评估水体污染程度。

生物毒性：通过检测特定生物对样品的反应，评估样品中的毒性物质含量。

有机物质浓度：测量有机物质（如悬浮物、有机碳等）的含量，用于评估水体的有机污染情况。

细菌菌落总数：测量样品中细菌菌落的数量，用于评估水体的卫生状况。

总悬浮物浓度：测量样品中悬浮物的含量，用于判断水体的浑浊程度。

氨氮浓度：测量样品中的氨氮含量，用于判断水体中氮的含量和污染程度。

总磷浓度：测量样品中总磷的含量，用于评估水体中磷的营养状态和污染情况。

总氮浓度：测量样品中总氮的含量，用于评估水体中氮的营养状态和污染情况。

亚硝酸盐浓度：测量样品中亚硝酸盐的含量，用于判断水体中硝酸盐的转化情况和污染程度。

硝酸盐浓度：测量样品中硝酸盐的含量，用于评估水体中的氮污染情况。

电导率：测量样品的电导率，用于判断水体中的电离物质含量和溶解度。

COD（化学需氧量）：测量样品中的COD值，用于评估水体中的有机污染程度。

BOD（生化需氧量）：测量样品中的BOD值，用于评估水体中的有机物质分解能力。

酶活性：测量样品中特定酶的活性，用于判断水体中的生化反应情况。

含水率：测量样品中水分的含量，用于评估水体的水分状况。

悬浮物平均粒径：测量样品中悬浮物颗粒的平均粒径，用于判断水体的悬浮物质的大小分布。

硫酸盐浓度：测量样品中硫酸盐的含量，用于评估水体中的硫污染程度。

检测样品（部分）

环境水样

地下水

地表水

废水

生活饮用水

工业用水

医疗废水

农田灌溉水

水产养殖水

矿山废水

饮用酒水

水产品

农产品

食品

药品

化学品

化妆品

环境样品

水文水质评估

土壤样品

检测仪器（部分）

光谱仪

荧光光谱仪

气相色谱仪

液相色谱仪

质谱仪

电化学分析仪

原子吸收光谱仪

原子荧光光谱仪

电导率仪

比色计

检测标准（部分）

《 T/GDBK 007-2023 焙烤食品中丙烯醛的快速测定酶标仪法（荧光探针法）》标准简介

标准名称：焙烤食品中丙烯醛的快速测定酶标仪法（荧光探针法）
标准号：T/GDBK 007-2023
中国标准分类号：/C141
发布日期：2023-10-20
国际标准分类号：67.050
实施日期：2023-10-20
团体名称：广东省焙烤食品糖制品产业协会
标准分类：焙烤食品制造
内容简介：
本文件规定了焙烤食品中丙烯醛含量测定的荧光法快速测定的原理、试剂和材料、仪器设备、样品制备、试验步骤、试验数据处理、精密度和试验报告等
本文件适用于焙烤食品中丙烯醛的测定，方法检出限为1.12μg/kg，定量限为3.92μg/kg
4　原理N-乙酸甲酯-4-巯基-1，8-萘酰亚胺中的巯基对萘酰亚胺荧光母核具有PET效应，其本身荧光十分微弱；而当丙烯醛存在的情况下，N-乙酸甲酯-4-巯基-1，8-萘酰亚胺的巯基与丙烯醛通过迈克尔加成反应形成加合产物，使得PET效应被抑制，加合物在波长380nm发射光激发下产生强荧光，峰值在510nm波长处，其荧光强度在固定条件下与待测样品中丙烯醛浓度成正比，使用带荧光检测器的酶标仪检测，外标法定量。荧光探针法测定丙烯醛的原理见图1。图1荧光探针法测定丙烯醛的原理图5　试剂和材料　5.1　试剂除非另有说明，所有试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。4-溴-1，8-萘二甲酸酐（分析纯）。甘氨酸（分析纯）。三乙胺（分析纯）。乙醇（分析纯）。盐酸（分析纯）。对甲苯磺酸（分析纯）。甲醇（分析纯）。九水合硫化钠（分析纯）。二甲基亚砜（DMSO，分析纯）。柠檬酸（分析纯）。磷酸氢二钠（分析纯）。丙烯醛（分析纯）。5.2　荧光探针的制备将554mg4-溴-1，8-萘二甲酸酐和165mg甘氨酸、252mg三乙胺在80℃的乙醇回流磁力搅拌反应6h，反应完成后冷却至室温，向反应液中加入2.5mL1M盐酸溶液调节pH至白色沉淀析出，经抽滤得到的固体分别用10mL水和乙醇进行洗涤，得到的白色固体即为N-乙酸基-4-溴-1，8-萘酰亚胺；室温下，将167mgN-乙酸基-4-溴-1，8-萘酰亚胺和600mg九水合硫化钠溶解于5mLN，N-二甲基甲酰胺中搅拌反应24h，反应结束后将反应液倒入20mL水中，并用1M盐酸水溶液调节pH至2，有黄色沉淀析出。经抽滤得到的固体用水洗涤五遍后，得到的黄色固体即为N-乙酸基-4-巯基-1，8-萘酰亚胺（Pr-ACR），冷冻干燥，置于-20℃冰箱中备用。5.3　试剂配制柠檬酸-磷酸氢二钠缓冲液pH为2.2，1mmol/L，15.198g一水合柠檬酸和1.955g十二水合磷酸氢二钠溶解于水中，再用250mL容量瓶定容。探针母液：2.15mgPr-ACR溶于0.5mLDMSO中，制成浓度为150mmol/L探针母液，母液要现配现用。探针工作液：移取50μLPr-ACR母液加入到5mL容量瓶中，用4.3.1的缓冲溶液定容到5mL，工作液要现配现用。5.4　标准品丙烯醛标准品（C3H4O,CAS号：107-02-8）：纯度大于98.0%。5.5　标准溶液的配置用水配制成丙烯醛浓度为30μmol/L的溶液，再用水稀释混匀得到一系列浓度的标准溶液（0μmol/L、3μmol/L、6μmol/L、12μmol/L、18μmol/L、24μmol/L、30μmol/L）。6　仪器设备6.1　酶标仪（带荧光检测器，Ex250-600nm，Em280-600nm)。6.2　96孔板（黑色）。6.3　粉碎机(细度30-100目）。6.4　天平：感量0.00001g。6.5　移液枪（1μL-10μL、10μL-100μL和100μL-1000μL）。6.6　常规玻璃仪器。6.7　离心机（12000转/分，14000×g)。7　试验步骤7.1　准曲线的绘制移取100μL4.3.3中的探针工作液到96孔板中，再加入50μL4.5中不同浓度的丙烯醛标准液，使丙烯醛浓度分别为0μmol/L、1μmol/L、2μmol/L、4μmol/L、6μmol/L、8μmol/L、10μmol/L，摇匀，并置于25℃下反应90min后，置于酶标仪中进行荧光检测，读取波长510nm处的荧光强度值（激发波长为380nm），其荧光发射光谱图见附录A。7.2　样品的制备将1g磨碎的食品粉末加入到15mL离心管中，加入5mL水，搅拌均匀并超声提取20min，再用离心机在10000r/min的转速下离心20min，收集上清液。离心管中的沉淀物质再用2mL水按上述操作重复提取两次，合并3次提取得到的上清液，定容到10mL，备用。7.3　样品的测定　移取100μL4.3.3中的探针工作液到黑色96孔板中，再加入50μL6.2中的样品提取液，摇匀，置于25℃下反应90min后，用酶标仪进行荧光检测，读取波长510nm处的荧光强度值（激发波长为380nm），每次处理重复3次。7.4　空白实验除不称取样品外，均按照上述测定条件和步骤进行。8　试验数据处理样品中丙烯醛的含量按以下公式计算：……………………………………（1）式中：X——样品中丙烯醛的含量，毫克/千克（mg/kg)；56.06——丙烯醛的摩尔质量；C——样品液中丙烯醛的摩尔质量浓度，微摩/升（μmol/L)；V——被测样品的总体积，毫升（mL）；m——称取样品的质量，克（g）。计算结果以重复性条件下获得的3次独立测定结果的算术平均值表示，结果保留三位有效数字。9　精密度9.1　一般规定本文件的精密度按照GB/T6379.2的规定确定，重复性和再现性的值以95%的可信度来计算。9.2　重复性在重复性条件下，获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。9.3　再现性在再现性条件下，获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。10　试验报告试验报告至少应给出以下几个方面的内容：——试验对象；——所使用的标准；——所使用的方法；——结果；——观察到的异常现象；——试验日期。附录A（资料性）荧光发射光谱图