蛋白质甲基转移酶检测

检测信息（部分）

蛋白质甲基转移酶是一类催化甲基基团从S-腺苷甲硫氨酸转移至蛋白质底物特定氨基酸残基的酶类，在表观遗传调控、信号转导及表达调控中发挥关键作用。该酶类活性异常与多种恶性肿瘤、神经退行性疾病及代谢性疾病密切相关，已成为药物研发的重要靶点。检测服务涵盖酶活性定量分析、底物特异性鉴定、抑制剂筛选及动力学参数测定等内容，为生物医药研究、诊断标志物开发及靶向药物质量控制提供数据支持。检测过程依据相关药典标准及实验室规范，确保结果具有可追溯性。

检测范围（部分）

• 组蛋白赖氨酸甲基转移酶
• 组蛋白精氨酸甲基转移酶
• DNA甲基转移酶
• RNA甲基转移酶
• 蛋白质精氨酸甲基转移酶1型
• 蛋白质精氨酸甲基转移酶2型
• 含SET结构域甲基转移酶
• DOT1L甲基转移酶
• EZH2甲基转移酶
• MLL家族甲基转移酶
• SUV39H1甲基转移酶
• G9a甲基转移酶
• PRMT1甲基转移酶
• PRMT5甲基转移酶
• CARM1甲基转移酶
• DNMT1甲基转移酶
• DNMT3A甲基转移酶
• DNMT3B甲基转移酶
• METTL3甲基转移酶复合体
• METTL14甲基转移酶复合体
• 重组表达甲基转移酶蛋白
• 细胞裂解液中甲基转移酶

检测标准（部分）

序号	标准号	标准名称	类别	发布日期	CCS分类	ICS分类
1	GB/T 17811-2025	动物源性蛋白质饲料胃蛋白酶消化率的测定 过滤法	(CN-GB)国家标准	2025-08-01	B46畜禽饲料与添加剂	65.120饲料
2	DB21/T 3767-2023	大豆来源蛋白质饲料原料预消化酶解工艺技术规范	(CN-DB21)辽宁省地方标准	2023-06-30	B46畜禽饲料与添加剂	65.120饲料
3	GB/T 17811-1999	动物蛋白质饲料消化率的测定　胃蛋白酶法	(CN-GB)国家标准	1999-08-10	B46畜禽饲料与添加剂	65.120饲料
4	GB/T 17811-2008	动物性蛋白质饲料胃蛋白酶消化率的测定 过滤法	(CN-GB)国家标准	2008-04-09	B46畜禽饲料与添加剂	65.120饲料
5	农业部2406号公告-5-2016	转基因生物及其产品食用安全检测外源蛋白质致敏性人血清酶联免疫试验	(CN-GB-NY)国家农业标准		B04基础标准与通用方法	65.020.01农业和林业综合
6	UNE 64062:1978	MIXED FEEDS AND RAW MATERIALS. EVALUATION OF RAW PROTEIN SOLUBILIZED BY PEPSINE AND CLORHYDRIC ACID.	(ES-UNE)西班牙标准	1978-05-15

检测项目（部分）

• 酶活性测定：通过定量分析单位时间内产物生成量，评估酶催化效率及功能状态。
• 米氏常数Km测定：反映酶与底物的亲和力大小，为酶动力学特性分析提供核心参数。
• 很大反应速率Vmax测定：表征酶被底物饱和时的很大催化能力，用于评估酶制剂质量。
• 底物特异性分析：确定酶对不同蛋白质或多肽底物的选择性催化能力，明确作用靶点。
• S-腺苷甲硫氨酸消耗率：通过检测辅因子消耗量间接反映甲基转移反应进程。
• S-腺苷同型半胱氨酸生成量：作为甲基转移反应的直接产物，用于验证酶活性。
• 蛋白质甲基化修饰位点鉴定：采用质谱技术确定被修饰的具体氨基酸位置。
• 单甲基化修饰定量：检测蛋白质单甲基化修饰水平，评估酶修饰程度。
• 二甲基化修饰定量：区分并定量对称性或非对称性二甲基化修饰产物。
• 三甲基化修饰定量：测定三甲基化修饰含量，反映酶的持续催化能力。
• 组蛋白甲基转移酶活性：针对组蛋白H3、H4等核心组蛋白底物的特异性活性检测。
• 精氨酸甲基转移酶活性：专门检测PRMT家族酶对精氨酸残基的甲基化催化能力。
• 赖氨酸甲基转移酶活性：检测SET结构域酶类对赖氨酸残基的甲基化修饰活性。
• 酶抑制剂筛选：通过IC50测定评估候选化合物对酶活性的抑制效果。
• 酶稳定性测试：考察酶在不同温度、pH值及储存条件下的活性保持率。
• 催化效率kcat测定：计算单位酶分子每秒转化底物的分子数，表征催化效能。
• 抑制常数Ki测定：定量评价抑制剂与酶结合的亲和力强度。
• 酶纯度分析：采用电泳或色谱法测定酶制剂的纯度百分比。
• 蛋白质浓度测定：采用BCA法或Bradford法精确定量样品中酶蛋白含量。
• 等电点测定：通过等电聚焦电泳确定酶蛋白的等电点pH值。
• 分子量测定：采用质谱或凝胶过滤色谱确定酶蛋白的精确分子质量。
• 热变性温度Tm测定：通过差示扫描量热法评估酶蛋白的热稳定性。

总结

蛋白质甲基转移酶检测服务通过多种技术手段实现酶活性、底物特异性、修饰位点及抑制剂效能的全面表征。检测过程结合色谱分离、质谱鉴定及免疫分析等技术，确保定量结果的准确性与重复性。检测结果可为表观遗传学研究、靶向药物开发及转化研究提供可靠的实验依据，推动相关领域的基础研究与应用转化进程。

检测仪器（部分）

• 高效液相色谱仪
• 超高效液相色谱仪
• 液相色谱-串联质谱联用仪
• 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱仪
• 荧光分光光度计
• 多功能酶标仪
• 等温滴定微量热仪
• 表面等离子体共振仪
• 圆二色光谱仪
• 差示扫描量热仪
• 微量热泳动仪
• 生物膜干涉技术分析仪
• 荧光偏振检测系统

检测方法（部分）

• 放射性同位素标记法：采用氚标S-腺苷甲硫氨酸作为甲基供体，通过测定放射性产物定量酶活性。
• 荧光检测法：利用荧光标记底物或抗体，通过荧光信号变化测定甲基化水平。
• 比色法：基于抗体识别的ELISA方法定量甲基化产物，适用于高通量筛选。
• 高效液相色谱法：分离并定量S-腺苷甲硫氨酸及其代谢产物，计算酶反应速率。
• 液相色谱-质谱联用法：精确鉴定甲基化位点并定量修饰程度，提供分子量信息。
• 免疫印迹法：采用甲基化特异性抗体检测目标蛋白的甲基化修饰状态。
• 等温滴定量热法：直接测量酶与底物或抑制剂结合过程中的热量变化。
• 表面等离子体共振法：实时监测分子相互作用，测定结合动力学参数。
• 荧光偏振法：通过偏振信号变化检测小分子与酶的结合情况。
• AlphaLISA技术：采用供体受体微球系统实现均相免疫检测，灵敏度较高。
• 时间分辨荧光共振能量转移法：利用镧系元素长荧光寿命特性降低背景干扰。