氨基酸检测：揭开身体健康背后的重要密码

本文件规定了血清中?26?对手性氨基酸（L-丙氨酸、L-丝氨酸、L-脯氨酸、L-缬氨酸、L-苏氨酸、L-半胱氨酸、L-亮氨酸、L-异亮氨酸、L-天冬酰胺、L-天冬氨酸、L-谷氨酰胺、L-谷氨酸、L-组氨酸、L-苯丙氨酸、L-精氨酸、L-色氨酸、L-赖氨酸、L鸟氨酸、L-瓜氨酸、L-羟基脯氨酸、L-α-氨基己二酸、L-正缬氨酸、L-犬尿氨酸、L-2-氨基丁酸、L-甲硫氨酸、L-酪氨酸、D-丙氨酸、D-丝氨酸、D-脯氨酸、D-缬氨酸、D-苏氨酸、D-半胱氨酸、D-亮氨酸、D-异亮氨酸、D-天冬酰胺、D-天冬氨酸、D-谷氨酰胺、D-谷氨酸、D-组氨酸、D-苯丙氨酸、D-精氨酸、D-色氨酸、D-赖氨酸、D-鸟氨酸、D-瓜氨酸、D-羟基脯氨酸、D-α-氨基己二酸、D-正缬氨酸、D-犬尿氨酸、D-2-氨基丁酸、D-甲硫氨酸和D-酪氨酸）的高效液相色谱-串联质谱测定方法。本文件适用于血清中?26?对手性氨基酸的测定。

本文件规定了血清中?37?种游离氨基酸（3-甲基组氨酸、α-氨基己二酸、丙氨酸、L-鹅肌肽、精氨酸、精氨琥珀酸、天冬酰胺、天冬氨酸、β-氨基异丁酸、β-丙氨酸、L-肌肽、瓜氨酸、胱硫醚、胱氨酸、乙醇胺、γ-氨基丁酸、谷氨酰胺、谷氨酸、甘氨酸、高瓜氨酸、同型半胱氨酸、组氨酸、羟脯氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸、蛋氨酸、鸟氨酸、O-磷酸乙醇胺、苯丙氨酸、脯氨酸、肌氨酸、丝氨酸、苏氨酸、色氨酸、酪氨酸、缬氨酸）的高效液相色谱-串联质谱检测方法，包括试剂配制、样品制备、仪器检测、数据分析等内容。本文件适用于利用高效液相色谱-串联质谱法检测血清中?37?种游离氨基酸。

本文件规定了枸杞干果、鲜果及原浆中18种游离氨基酸和核苷的液相色谱-质谱联用法。本文件适用于枸杞干果、鲜果及原浆中18种游离氨基酸和核苷：天冬氨酸、苏氨酸、丝氨酸、谷氨酸、甘氨酸、丙氨酸、缬氨酸、甲硫氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、组氨酸、赖氨酸、精氨酸、腺嘌呤、尿嘧啶、肌苷、鸟苷的测定。

本标准规定了含多肽氨基酸水溶肥料的术语和定义、要求、试验方法、检验规则、标识、包装、运输和贮存。本标准适用于将以动物源、植物源、微生物发酵的蛋白质为主要原料经提取后制备的多肽添加到固体或液体氨基酸水溶肥料中制成的含多肽氨基酸水溶肥料。

本文件规定了咖啡生豆中氨基酸总量测定的术语和定义，原理、仪器和器皿，试剂和溶液、分析步骤，结果计算和检测报告的方法

本文件适用于咖啡生豆中氨基酸总量的测定

1　术语和定义下列术语和定义适用于本文件。1.1咖啡生豆咖啡生豆即未烘焙过的咖啡豆，按GB/T18007的5.6规定执行1.2茚三酮比色法按GB5009.124规定执行2　原理氨基酸在pH8.0的条件下与茚三酮反应，形成紫色络合物，用分光光度法在570nm的波长下测定其含量。3　仪器和器皿3.1分析天平：感量0.0001g。3.2可见光分光光度仪。3.3安瓿瓶。3.4陶瓷蒸发皿。3.5比色管：磨口，50mL。3.6比色杯：1cm。3.7容量瓶：25mL、50mL、100mL、1000mL。3.8酒精喷灯。3.9研磨机或组织粉碎机。4　试剂和溶液除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯（AR），水为蒸馏水。4.1试剂4.1.1亮氨酸：纯度≥98%。4.1.2浓盐酸（HCl）：质量分数≥36%。4.1.3磷酸氢二钠（Na2HPO4?12H2O）。4.1.4磷酸二氢钾（KH2PO4）。4.1.5茚三酮：纯度≥95%。4.1.6氯化亚锡（SnCl2?2H2O）。4.2溶液配制4.2.16mol/L盐酸溶液：取500mL浓盐酸（6.1.2）加水稀释至1000mL，混匀。4.2.2pH8.0磷酸盐缓冲液配制4.2.2.11/15mol/L磷酸氢二钠：称取11.9g十二水磷酸氢二钠（Na2HPO4?12H2O），加水溶解后定容至1000mL。4.2.2.21/15mol/L磷酸二氢钾：称取经110℃烘干2小时的磷酸二氢钾（KH2PO4）0.908g，加水溶解后定容至100mL，摇匀备用。4.2.2.3取1/15mol/L磷酸氢二钠溶液（6.2.2.1）950mL和1/15mol/L磷酸二氢钾溶液（6.2.2.2）50mL，混匀，该混合溶液pH为8.0。4.2.32%茚三酮溶液配制称取茚三酮（纯度≥95%）2g，加50mL水和80mg氯化亚锡（SnCl2?2H2O）搅拌均匀。分次加少量水溶解，放在暗处，静置一昼夜，过滤后加水定容至100mL容量瓶中，摇匀备用。4.2.4标准溶液配制4.2.4.1亮氨酸10mg/mL标准储备液：精确称量亮氨酸（纯度≥98%）0.25g，用蒸馏水溶解后，定量转入25mL容量瓶中，加水至标线，摇匀，此时标准储备液1mL含有10mg的亮氨酸。4.2.4.2亮氨酸标准系列工作溶液：精确移取0.50mL、1.00mL、1.50mL、2.00mL、2.50mL、3.00mL标准储备液（6.2.4.1），分别加水定容至50mL容量瓶中，摇匀。该系列标准工作液1mL分别含有0.10mg、0.20mg、0.30mg、0.40mg、0.50mg、0.60mg亮氨酸。5　分析步骤5.1样品制备取样按照NY/T1518的规定执行，样品制备按照GB5009.124-2016中5.1的规定。5.2样品试液制备称取试样100mg～200mg（0.1mg），于10mL安瓿瓶中，准确加入10mL6mol/L盐酸溶液，用酒精喷灯封口，封口后的安瓿瓶放入110℃±1恒温箱内水解24h后，取出冷却至室温。打开安瓿瓶将水解液全部转移至陶瓷蒸发皿中，70℃水浴蒸干，加水溶解后过滤至容量瓶中用水定容至100mL，制成待测液，备用。5.3测定准确吸取待测液（7.2）1mL，注入50mL比色管中，加0.5mLpH8.0磷酸缓冲液（6.2.2）和0.5mL2%茚三酮溶液（6.2.3），混合均匀，在沸水浴中加热15min，立即冷却后加水定容至50mL。放置10min后，1cm比色杯，在570nm处，以试剂空白溶液作参比，测定吸光度(A)。5.4亮氨酸标准曲线的制作分别准确吸取1mL亮氨酸系列标准工作液（6.2.4.2）于一组50mL比色管中，按7.3的操作测定吸光度(A)。将测得的吸光度作为y坐标，对应的亮氨酸含量作为x坐标，绘制标准曲线。5.5空白试验除不加试样外，均按上述测定步骤进行。6　结果计算6.1计算方法咖啡生豆中氨基酸总量以干基质量分数（%）表示，按式（1）计算：式中：C—根据7.4测定的吸光度从标准曲线上查得的亮氨酸的毫克数，单位为毫克（mg）；V1—试液总量，单位为毫升（mL）；V2—测试用试液量，单位为毫升(mL)；m—试样重量，单位为克（g）；ω—试样干物质含量（质量分数）（%）。取两次测定的算数平均值作为结果，保留小数点后2位。6.2重复性在重复条件下同一样品获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的5%。7　检测报告检测报告应包括下列内容：——使用的方法；——测定的结果（取小数点后两位）；——试样的规格、名称、产地、品种；试验日期、操作人员。

本规程适用于食品安全、医药卫生、临床检验和饲料监察等分析用氨基酸分析仪（以下简称仪器）的首次检定、后续检定和使用中检验。

本规程规定了氨基酸分析仪的检定方法,规程中所列检定方法适用于利用柱前衍生C18柱分离氨基酸,带自动恒温水解装置的高效仪器。仪器适合于分析含氨基酸的样品,可对水解氨基酸及游离氨基酸进行定性、定量分析。广泛用于生化、医药、食品、化工及农业等领域。

本标准规定了重组双碱性氨基酸内肽酶（rKex2）的质量控制要求、检测指标、检测方法和贮存条件

本标准适用于生物医药工业领域重组双碱性氨基酸内肽酶的质量控制

本文件规定了香菇、羊肚菌等食用菌中游离氨基酸含量的高效液相色谱-质谱联用测定方法

本文件适用于香菇、羊肚菌等食用菌中20种游离氨基酸（蛋氨酸、甘氨酸、缬氨酸、色氨酸、组氨酸、丝氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸、苏氨酸、丙氨酸、脯氨酸、酪氨酸、天冬氨酸、天冬酰胺、精氨酸、赖氨酸、谷氨酰胺、谷氨酸、γ-氨基丁酸）的测定

本文件规定了水溶肥料中游离氨基酸含量测定的分光光度法的试验方法

本文件适用于液体或固体水溶肥料（乐土富安含氨基酸水溶肥料及由酒精废液、糖蜜液、酸性氨基酸原粉、碱性氨基酸原粉生产的水溶肥料）中游离氨基酸的测定

其原理为：用活性炭吸附蛋白质和消除色素干扰，用EDTA络合金属元素释放氨基酸，氨基酸与茚三酮反应成蓝色物质，在一定浓度范围内，蓝色溶液的吸光度与氨基酸量成正比关系，用分光光度法测定出总的氨基酸含量，然后除以矫正系数，得到游离氨基酸含量

本文件规定了葡萄酒中16种游离氨基酸的液相色谱-串联质谱检测方法

本文件适用于葡萄酒中苯丙氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、甲硫氨酸、缬氨酸、脯氨酸、酪氨酸、丙氨酸、苏氨酸、甘氨酸、丝氨酸、谷氨酸、天冬氨酸、组氨酸、精氨酸、赖氨酸含量的测定和确证

本标准规定了氨基酸的绿色设计产品评价术语和定义、评价要求、检验方法和指标计算方法、产品生命周期评价报告编制方法、评价方法

本标准适用于氨基酸（L-谷氨酸钠、L-盐酸赖氨酸、L-苏氨酸、L-色氨酸）的绿色设计产品评价

本标准规定了氨基酸行业绿色工厂的基础设施、管理体系、能源与资源投入、产品、环境排放、绩效和评价程序

本标准适用于对生物技术生产氨基酸产品的绿色工厂的评价