副溶血性弧菌检测：如何科学识别这一致病微生物？

检测信息（部分）

副溶血性弧菌是一种广泛分布于海洋环境中的革兰氏阴性杆菌，属于弧菌属，是引起食源性疾病的重要病原微生物之一。该菌具有较强的嗜盐性，适宜在含盐环境中生长繁殖，主要通过污染的海产品传播给人类，感染后可导致急性胃肠炎，表现为腹痛、腹泻、恶心、呕吐、发热等症状。副溶血性弧菌检测在食品安全监管、疾病预防控制、海产品加工质量监控等领域具有重要的应用价值，通过科学规范的检测流程，可以有效识别和控制该致病微生物的传播风险，保障公众健康安全。

检测方法（部分）

• GB 4789.7-2013 培养法——国家标准培养鉴定方法
• PCR分子检测法——特异性片段扩增
• 实时荧光定量PCR法——快速定量检测
• 环介导等温扩增法——等温核酸扩增技术
• 酶联免疫吸附法——免疫学快速筛查
• 胶体金免疫层析法——便捷快速检测
• 生化鉴定管法——传统生化反应鉴定
• 血清学凝集法——血清型别鉴定
• 测序法——精确分子鉴定
• 显色培养基法——快速分离鉴定
• MPN计数法——很大可能数定量
• 平板计数法——菌落直接计数

检测范围（部分）

• 海鱼——包括带鱼、黄鱼、鲳鱼等
• 虾类——包括对虾、基围虾、小龙虾等
• 蟹类——包括梭子蟹、大闸蟹、青蟹等
• 贝类——包括蛤蜊、扇贝、贻贝等
• 牡蛎——生蚝等双壳贝类
• 鲍鱼——高档海产贝类
• 海参——棘皮动物类海产品
• 海胆——棘皮动物类食材
• 章鱼——头足纲软体动物
• 鱿鱼——头足纲海产品
• 墨鱼——乌贼类海产品
• 海带——褐藻类海藻
• 紫菜——红藻类食用藻
• 裙带菜——褐藻类海洋蔬菜
• 淡水鱼——可能交叉污染的水产品
• 腌制海产品——咸鱼、虾酱等
• 冷冻海产品——速冻海鲜类
• 即食海产品——开袋即食类
• 生食水产品——刺身、生蚝等
• 鱼糜制品——鱼丸、鱼糕等
• 海产品罐头——金枪鱼罐头等
• 调味海产品——调味鱿鱼丝等
• 干制海产品——干贝、鱼干等
• 海水——养殖环境水体
• 淤泥——海洋底质样品

检测标准（部分）

序号	标准号	标准名称	类别	发布日期	CCS分类	ICS分类
1	GB 4789.7-2013	食品安全国家标准　食品微生物学检验　副溶血性弧菌检验	(CN-GB)国家标准	2013-11-29	X09卫生、安全、劳动保护	07.100.30食品微生物学
2	GB/T 4789.7-2008	食品卫生微生物学检验　副溶血性弧菌检验	(CN-GB)国家标准	2008-05-16	C53食品卫生	07.100.30食品微生物学
3	GB/T 4789.7-2003	食品卫生微生物学检验　副溶血性弧菌检验	(CN-GB)国家标准	2003-08-11	C53食品卫生	07.100.30食品微生物学
4	GB/T 4789.7-1994	食品卫生微生物学检验 副溶血性弧菌检验	(CN-GB)国家标准	1994-03-18	C53食品卫生	07.100.30食品微生物学
5	SN/T 4624.5-2016	入境环保用微生物菌剂检测方法 第5部分:β型溶血性链球菌	(CN-SN)行业标准-商品检验	2016-08-23	Z04基础标准与通用方法	07.100微生物学
6	ISO 21872-1:2017/Amd 1:2023	Microbiology of the food chain — Horizontal method for the determination of Vibrio spp. — Part 1: Detection of potentially enteropathogenic Vibrio parahaemolyticus, Vibrio cholerae and Vibrio vulnificus — Amendment 1: Inclusion of performance testing of culture media and reagents	(IX-ISO)国际标准化组织	2023-02-20		07.100.30食品微生物学
7	ISO/TS 21872-2:2020	Microbiology of the food chain — Horizontal method for the determination of Vibrio spp. — Part 2: Enumeration of total and potentially enteropathogenic Vibrio parahaemolyticus in seafood using nucleic acid hybridization	(IX-ISO)国际标准化组织	2020-10-27		07.100.30食品微生物学
8	ISO 8914:1990	Microbiology — General guidance for the detection of Vibrio parahaemolyticus	(IX-ISO)国际标准化组织	1990-11-22		07.100.01微生物学综合
9	DIN EN ISO 21872-1:2023-06	Microbiology of the food chain - Horizontal method for the determination of Vibrio spp. - Part 1: Detection of potentially enteropathogenic Vibrio parahaemolyticus, Vibrio cholerae and Vibrio vulnificus (ISO 21872-1:2017 + Amd 1:2023) (includes Amendment A1:2023)	(DE-DIN)德国标准化学会	2023-06-01
10	ISO 21872-1:2017	Microbiology of the food chain — Horizontal method for the determination of Vibrio spp. — Part 1: Detection of potentially enteropathogenic Vibrio parahaemolyticus, Vibrio cholerae and Vibrio vulnificus	(IX-ISO)国际标准化组织	2017-07-10		07.100.30食品微生物学
11	ISO/TS 21872-1:2007	Microbiology of food and animal feeding stuffs — Horizontal method for the detection of potentially enteropathogenic Vibrio spp. — Part 1: Detection of Vibrio parahaemolyticus and Vibrio cholerae	(IX-ISO)国际标准化组织	2007-04-17		07.100.30食品微生物学
12	ГОСТ ISO/TS 21872-1-2013	Микробиология пищевых продуктов и кормов для животных. Горизонтальный метод обнаружения потенциально энтеропатогенных Vibrio spp. Часть 1. Обнаружение бактерий Vibrio parahaemoliticus и Vibrio cholerae	(RU-GOST)俄罗斯国家标准	2013-11-27	B40畜牧综合	07.100.30食品微生物学
13	AS/NZS 1766.2.9:1997	Food microbiology, Method 2.9: Examination for specific organisms - Vibrio parahaemolyticus	(AU-AS/NZS)澳大利亚/新西兰标准	1997-12-05
14	BS 5763-14:1991	Methods for microbiological examination of food and animal feeding stuffs-Detection of Vibrio parahaemolyticus	(GB-BSI)英国标准学会	1991-02-28
15	ISO/TS 21872-2:2007	Microbiology of food and animal feeding stuffs — Horizontal method for the detection of potentially enteropathogenic Vibrio spp. — Part 2: Detection of species other than Vibrio parahaemolyticus and Vibrio cholerae	(IX-ISO)国际标准化组织	2007-04-17		07.100.30食品微生物学
16	DIN EN ISO 21872:2016-04	Microbiology of the food chain - Horizontal method for the detection of potentially enteropathogenic Vibrio parahaemolyticus, Vibrio cholerae and Vibrio vulnificus (ISO/DIS 21872:2016); German and English version prEN ISO 21872:2016	(DE-DIN)德国标准化学会	2016-04-01		07.100微生物学
17	EN ISO 21872-1:2017	Microbiology of the food chain - Horizontal method for the determination of Vibrio spp. - Part 1: Detection of potentially enteropathogenic Vibrio parahaemolyticus, Vibrio cholerae and Vibrio vulnificus (ISO 21872-1:2017)	(IX-CEN)欧洲标准化委员会	2017-07-12	X00/09食品综合	07.100.30食品微生物学
18	AS 1766.2.9-1991	Food microbiology, Method 2.9: Examination for specific organisms - Vibrio parahaemolyticus	(AU-AS)澳大利亚标准	1990-12-31
19	KS J ISO 8914	미생물학－장염 비브리오균 검출 일반지침	(KR-KS)韩国标准	2007-11-23		07.100.01微生物学综合
20	KS J ISO 8914-2007	미생물학－장염 비브리오균 검출 일반지침	(KR-KS)韩国标准	2007-11-23		07.100.01微生物学综合

检测仪器（部分）

• 生物显微镜——观察细菌形态结构
• 恒温培养箱——提供细菌生长适宜温度
• 超净工作台——保证无菌操作环境
• 高压灭菌锅——培养基和器皿灭菌
• 离心机——样品前处理分离
• PCR仪——核酸扩增检测
• 实时荧光定量PCR仪——定量分子检测
• 电泳仪——核酸片段分离分析
• 凝胶成像系统——电泳结果记录分析
• 酶标仪——酶联免疫检测读数
• 恒温水浴锅——恒温反应条件控制
• 电子天平——试剂和样品称量
• 均质器——样品均质化处理
• 涡旋振荡器——液体混合振荡
• pH计——培养基和试剂pH测定

检测项目（部分）

• 副溶血性弧菌定性检测——判断样品中是否存在该菌
• 副溶血性弧菌定量检测——测定样品中菌落含量
• 菌落总数测定——评估样品整体卫生状况
• 耐热直接溶血毒素检测——识别致病菌株关键毒力因子
• 耐热相关溶血毒素检测——评估菌株致病潜力
• 药物敏感性试验——指导用药选择
• 血清型分型——追踪污染来源和流行病学调查
• 分子生物学鉴定——通过确认菌种
• 生化特性鉴定——依据代谢特点进行鉴别
• 革兰氏染色镜检——观察细菌形态特征
• 运动性检测——验证细菌鞭毛活性
• 嗜盐性检测——确认菌株盐浓度适应范围
• 氧化酶试验——初步筛查弧菌属特征
• 过氧化氢酶试验——评估细菌酶活性
• 葡萄糖发酵试验——检测糖代谢能力
• 甘露醇发酵试验——辅助生化鉴定
• 蔗糖发酵试验——区分不同弧菌种类
• 乳糖发酵试验——鉴别细菌代谢特征
• 阿拉伯糖发酵试验——补充生化鉴定依据
• 甲基红试验——检测混合酸发酵产物
• V-P试验——验证丙酮酸代谢途径
• 硫化氢试验——检测氨基酸分解能力
• 靛基质试验——检测色氨酸代谢
• 枸橼酸盐利用试验——评估碳源利用能力
• 尿素酶试验——检测尿素分解活性

总结

副溶血性弧菌检测是保障海产品食品安全的重要技术手段，通过科学的检测方法和规范的检测流程，能够有效识别和控制这一致病微生物的风险。检测过程中需根据样品类型和检测目的选择合适的检测项目、仪器和方法，确保检测结果的准确性和可靠性。随着检测技术的不断发展，分子生物学方法与传统培养方法的结合应用，为副溶血性弧菌的快速、准确检测提供了更多选择，有助于提升食品安全监管水平，保护消费者健康权益。