检测信息(部分)
柠檬酸合成酶是三羧酸循环(TCA循环)中的关键限速酶,催化草酰乙酸与乙酰辅酶A缩合生成柠檬酸的反应,广泛存在于线粒体基质中。该酶活性的测定对于评估细胞有氧代谢能力、线粒体功能完整性以及能量代谢状态。在诊断中,柠檬酸合成酶活性是线粒体肌病、心肌缺血及代谢性疾病的重要参考指标;在食品工业中,该酶参与柠檬酸的生物合成过程;在科研领域,其常被用作线粒体提取纯度的标志酶。检测过程通常需要制备组织匀浆或线粒体悬液,通过分光光度法测定产物生成速率来计算酶活性。
总结
柠檬酸合成酶检测是评估线粒体功能和细胞能量代谢状态的重要技术手段,广泛应用于生命科学研究、诊断及工业发酵领域。检测过程需严格控制样品制备条件、反应体系参数及测定环境,以确保结果的准确性和重复性。采用DTNB分光光度法作为常规检测方法具有操作简便、灵敏度高的特点,适用于大多数实验室条件。检测机构应具备CMA或CNAS资质,按照标准操作规程执行检测,为客户提供准确可靠的检测报告。对于特殊样品或特定研究需求,可根据实际情况优化检测方案,选择合适的检测方法和仪器配置,确保检测数据真实可靠。
检测范围(部分)
- 哺乳动物心肌组织
- 哺乳动物骨骼肌组织
- 哺乳动物肝脏组织
- 哺乳动物肾脏组织
- 哺乳动物脑组织
- 植物叶片及种子
- 植物根茎组织
- 微生物菌体细胞
- 酵母细胞提取物
- 大肠杆菌培养物
- 线粒体分离提取物
- 细胞培养物匀浆
- 血液样本
- 血清样本
- 尿液样本
- 发酵液样品
- 食品添加剂原料
- 酶制剂产品
- 保健功能食品
- 细胞线粒体悬液
- 组织匀浆上清液
检测标准(部分)
| 序号 | 标准号 | 标准名称 | 类别 | 发布日期 | CCS分类 | ICS分类 |
|---|---|---|---|---|---|---|
| 1 | ISO/TS 2963:2006 | Cheese and processed cheese products — Determination of citric acid content — Enzymatic method | (IX-ISO)国际标准化组织 | 2006-04-26 | 67.100.30乳酪 | |
| 2 | KS H ISO TS 2963-2007(2021) | 치즈 및 가공 치즈류 제품-시트르산 함량 측정-효소법 | (KR-KS)韩国标准 | 2007-10-31 | 67.100.30乳酪 | |
| 3 | KS H ISO/TS 2963(2021 Confirm)(2021) | 치즈 및 가공 치즈류 제품-시트르산 함량 측정-효소법 | (KR-KS)韩国标准 | 2007-10-31 | 67.100.30乳酪 | |
| 4 | KS H ISO/TS 2963-2007(2021) | 치즈 및 가공 치즈류 제품-시트르산 함량 측정-효소법 | (KR-KS)韩国标准 | 2007-10-31 | 67.100.30乳酪 | |
| 5 | KS H ISO TS 2963-2007(2012) | 치즈 및 가공 치즈류 제품-시트르산 함량 측정-효소법 | (KR-KS)韩国标准 | 2007-10-31 | 67.100.30乳酪 | |
| 6 | ASTM D3598-89(2024) | Standard Test Method for Citrate in Synthetic Detergents | (US-ASTM)美国材料与试验协会 | 2024-11-01 | 71.100.40表面活性剂及其他助剂 | |
| 7 | BS DD ISO/TS 2963:2006 | Cheese and processed cheese products. Determination of citric acid content. Enzymatic method | (GB-BSI)英国标准学会 | 2006-09-29 | ||
| 8 | ГОСТ 32113-2013 | Продукция алкогольная и сырье для ее производства. Ферментативный метод определения массовой концентрации лимонной кислоты | (RU-GOST)俄罗斯国家标准 | 2013-03-25 | X04基础标准与通用方法 | 67.160.10酒精饮料 |
| 9 | ISO 2963:1997 | Cheese and processed cheese products — Determination of citric acid content — Enzymatic method | (IX-ISO)国际标准化组织 | 1997-03-13 | 67.100.30乳酪 | |
| 10 | DIN EN 1137:1994-12 | Fruit and vegetable juices - Enzymatic determination of citric acid (citrate) content by the NADH spectrometric method | (DE-DIN)德国标准化学会 | 1994-12-01 | ||
| 11 | UNE-EN 1139:1995 | FRUIT AND VEGETABLE JUICES. ENZYMATIC DETERMINATION OF D-ISOCITRIC ACID CONTENT. NADPH SPECTROMETRIC METHOD. | (ES-UNE)西班牙标准 | 1995-12-30 | ||
| 12 | ASTM D3598-89(2016) | Standard Test Method for Citrate in Synthetic Detergents | (US-ASTM)美国材料与试验协会 | 2016-07-01 | 71.100.40表面活性剂及其他助剂 | |
| 13 | ASTM D3598-89(2009) | Standard Test Method for Citrate in Synthetic Detergents | (US-ASTM)美国材料与试验协会 | 2009-10-01 | 71.100.40表面活性剂及其他助剂 | |
| 14 | ASTM D3598-89(1995)e1 | Standard Test Method for Citrate in Synthetic Detergents | (US-ASTM)美国材料与试验协会 | 1995-01-01 | ||
| 15 | ASTM D3598-89(2003) | Standard Test Method for Citrate in Synthetic Detergents | (US-ASTM)美国材料与试验协会 | 1989-05-26 | 71.100.40表面活性剂及其他助剂 | |
| 16 | DIN EN 1139:1994-12 | Fruit and vegetable juices - Enzymatic determination of D-isocitric acid content by the NADPH spectrometric method | (DE-DIN)德国标准化学会 | 1994-12-01 | ||
| 17 | BS 770-7:1997 | Methods for chemical analysis of cheese-Determination of citric acid content of cheese and processed cheese products (enzymatic method) | (GB-BSI)英国标准学会 | 1997-08-15 |
检测方法(部分)
- DTNB分光光度法:通过DTNB与CoA-SH反应生成黄色产物,在412nm处测定吸光度变化计算酶活性。
- 乙酰辅酶A消失法:监测乙酰辅酶A在232nm处吸光度的降低速率,计算酶催化反应速度。
- 柠檬酸产物测定法:采用柠檬酸裂解酶偶联反应体系,间接测定柠檬酸生成量。
- NADH偶联法:通过偶联反应监测NADH在340nm处吸光度变化,实现连续动态测定。
- 终止法测定:反应一定时间后终止反应,测定产物生成总量,适用于批量样品检测。
- 连续监测法:实时监测反应进程曲线,根据初速度计算酶活性,结果更为准确。
- 微量板法:采用96孔板进行高通量检测,适用于大规模样品筛选分析。
- Lowry蛋白测定法:利用Folin-酚试剂与蛋白显色反应测定蛋白质浓度。
- BCA蛋白测定法:基于BCA试剂与铜离子络合显色原理测定蛋白质含量。
- Bradford蛋白测定法:采用考马斯亮蓝染料结合法快速测定蛋白质浓度。
旗下实验室资质
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