自噬相关蛋白酶检测

检测信息

自噬相关蛋白酶检测主要针对参与细胞自噬过程的各类蛋白酶类物质进行定性与定量分析。自噬是细胞通过溶酶体途径降解受损细胞器、异常蛋白及入侵病原体的关键代谢过程，该过程涉及ATG系列蛋白、半胱氨酸蛋白酶、丝氨酸蛋白酶等多种酶类的级联反应与精准调控。通过检测自噬相关蛋白酶的活性水平、表达丰度及翻译后修饰状态，可评估细胞自噬通路的激活或抑制状态，为肿瘤发生机制研究、神经退行性疾病病理分析、药物筛选及毒理学评价提供核心数据支撑。能够满足科研院所、生物医药企业对自噬通路关键酶类的检测需求。

常见问题

问：自噬相关蛋白酶检测样本有哪些要求？

答：常规接受细胞裂解液、组织匀浆、血清及血浆样本，需在-80℃条件下保存运输，避免反复冻融导致蛋白酶活性丧失。

问：如何区分自噬激活与自噬阻滞？

答：需联合检测LC3-II/p62比值及自噬流双荧光指标，单纯LC3-II升高可能为自噬阻滞导致的积累，需结合p62降解情况综合判断。

问：检测周期通常需要多长时间？

答：常规酶活性及蛋白表达检测周期为7至10个工作日，涉及复杂机制研究的定制化检测方案需根据具体项目确定周期。

问：是否提供检测方法学开发服务？

答：旗下实验室可根据客户研究需求，针对特定自噬蛋白酶亚型或新型底物开发特异性检测方法并完成方法学验证。

检测范围

• 免疫印迹法，通过特异性抗体检测目标蛋白酶的表达水平及修饰状态。
• 免疫沉淀法，用于富集低丰度自噬相关蛋白酶以提高检测灵敏度。
• 荧光定量PCR法，检测自噬相关蛋白酶的mRNA转录水平。
• 流式细胞术，基于荧光标记抗体对细胞群体进行高通量蛋白表达分析。
• 免疫荧光显微成像法，通过亚细胞定位分析蛋白酶在自噬结构上的分布。
• 比色法酶活性检测，利用生色底物测定蛋白酶催化反应的吸光度变化。
• 质谱分析法，用于自噬相关蛋白酶的精确分子量测定及翻译后修饰位点鉴定。
• ELISA双抗体夹心法，对血清或细胞裂解液中的蛋白酶进行高灵敏度定量。
• 免疫共沉淀法，分析自噬相关蛋白酶复合物的组装状态及蛋白相互作用。

总结

自噬相关蛋白酶检测是解析细胞自噬分子机制、评估药物干预效果及研究疾病病理生理过程的重要技术手段。通过对ATG系列蛋白酶、调控激酶及溶酶体水解酶的系统检测，可全面揭示自噬通路的动态变化规律。配备的色谱、光谱及分子生物学分析设备，可为客户提供涵盖酶活性测定、蛋白表达分析、自噬流监测在内的综合检测服务，助力基础医学研究与生物医药研发项目的顺利开展。

检测标准（部分）

序号	标准号	标准名称	类别	发布日期	CCS分类	ICS分类
1	GB/T 34793-2017	蛋白酶K	(CN-GB)国家标准	2017-11-01	B20/39粮食、饲料作物综合	07.080生物学、植物学、动物学
2	GB/T 47329-2026	胶原蛋白酶活性及纯度检测方法	(CN-GB)国家标准	2026-03-31	C27生物制品与血液制品	07.080生物学、植物学、动物学
3	GB/T 34800-2017	蛋白酶K酶活力及杂质检测方法	(CN-GB)国家标准	2017-11-01	A21环境条件与通用试验方法	07.080生物学、植物学、动物学
4	GB/T 33410-2016	生化试剂中蛋白酶K活性检测方法	(CN-GB)国家标准	2016-12-30	G66生化试剂、临床分析试剂	71.040.30化学试剂
5	GB/T 42239.1-2022	洗涤用酶制剂 第1部分：碱性蛋白酶	(CN-GB)国家标准	2022-12-30	Y43牙膏、肥皂、洗涤剂	71.100.40表面活性剂及其他助剂
6	GB/T 17811-2025	动物源性蛋白质饲料胃蛋白酶消化率的测定 过滤法	(CN-GB)国家标准	2025-08-01	B46畜禽饲料与添加剂	65.120饲料
7	32017R1558	Commission Implementing Regulation (EU) 2017/1558 of 14 September 2017 amending Regulation (EU) No 37/2010 to classify the substance bromelain as regards its maximum residue limit (Text with EEA relevance. )	(IX-EURLEX)欧洲技术法规	2017-09-14	B15/19植物保护	71.100化工产品
8	GB/T 40368-2021	植物代谢产物胰蛋白酶抑制因子测定 酶联免疫吸附法	(CN-GB)国家标准	2021-08-20	A40基础学科综合	07.080生物学、植物学、动物学
9	GB/T 46002-2025	动物饲料大豆及其加工产品中胰蛋白酶抑制剂活性测定	(CN-GB)国家标准	2025-08-01	B46畜禽饲料与添加剂	65.120饲料
10	SB/T 10317-1999	蛋白酶活力测定法	(CN-SB)行业标准-商业	1999-04-15	X60/69食品发酵、酿造	07.080生物学、植物学、动物学
11	32011R0389	Commission Implementing Regulation (EU) No 389/2011 of 19 April 2011 concerning the authorisation of an enzyme preparation of endo-1,4-beta-xylanase, subtilisin and alpha-amylase as feed additive for laying hens (holder of authorisation Danisco Animal Nutrition) Text with EEA relevance	(IX-EURLEX)欧洲技术法规	2011-04-19	X60/69食品发酵、酿造	65.120饲料
12	GB/T 46002-2005	动物饲料大豆及其加工产品中胰蛋白酶抑制剂活性测定	(CN-GB)国家标准	2025-08-01	B46畜禽饲料与添加剂	65.120饲料
13	DB44/T 498-2008	菠萝蛋白酶	(CN-DB44)广东省地方标准	2008-05-26	X24果类加工与制品	67.080.10水果及其制品
14	GB/T 28715-2012	饲料添加剂酸性、中性蛋白酶活力的测定 分光光度法	(CN-GB)国家标准	2012-09-03	B46畜禽饲料与添加剂	65.120饲料
15	NY/T 4306-2023	木瓜、菠萝蛋白酶活性的测定 紫外分光光度法	(CN-NY)行业标准-农业	2023-02-17	B31瓜果、蔬菜种植与产品	67.080.01水果、蔬菜及其制品综合
16	GB 5009.224-2016	食品安全国家标准　大豆制品中胰蛋白酶抑制剂活性的测定	(CN-GB)国家标准	2016-08-31	X09卫生、安全、劳动保护	67.200.20含油种子
17	NY/T 4362-2023	饲料添加剂 角蛋白酶活力的测定 分光光度法	(CN-NY)行业标准-农业	2023-04-11	B46畜禽饲料与添加剂	65.120饲料
18	20262391-T-469	重组胰蛋白酶活性及纯度检测方法	(CN-PLAN)国家标准计划			07.080生物学、植物学、动物学
19	DB22/T 1819-2013	饲料用酶制剂中酸性蛋白酶活力的测定 分光光度法	(CN-DB22)吉林省地方标准	2013-05-15	B46畜禽饲料与添加剂	65.120饲料
20	GB/T 17811-1999	动物蛋白质饲料消化率的测定　胃蛋白酶法	(CN-GB)国家标准	1999-08-10	B46畜禽饲料与添加剂	65.120饲料