总黄酮含量检测,总黄酮含量检测标准

本文件规定了枸杞叶及枸杞茶中总黄酮含量的分光光度计测定方法

本文件适用于枸杞叶及枸杞茶中总黄酮含量的测定

本标准规定了刺梨及其制品中总黄酮含量（以芦丁计）测定的紫外分光光度法本标准适用于刺梨鲜果、刺梨干果、刺梨果脯、刺梨冻干粉、刺梨喷干粉、刺梨原汁、刺梨浓缩汁等刺梨及其制品中总黄酮含量的测定4方法原理黄酮类化合物是具有苯并吡喃环结构的一类天然化合物的总称

溶于乙醇的黄酮类化合物在弱碱性条件下，与铝盐络合反应后生成有色物质，可在420nm波长附近产生最大吸收

在一定浓度范围内，其吸光度与黄酮类化合物的含量成正比

与芦丁标准品比较，可定量测定黄酮类化合物的含量

5试剂和材料5.1试剂除另有规定外，仅使用分析纯试剂和GB/T6682规定的一级水

5.1.1芦丁（C27H30O16，CAS号：153-18-4）标准品，纯度≥98.0%

5.1.2无水乙醇（C2H6O）

5.1.3硝酸铝[Al.(NO3)3·9H2O]

5.1.4醋酸钾（C2H3KO2）

5.2试剂配制5.2.1芦丁对照品溶液（1mg/mL）：精密称取50mg（精确至0.1mg）芦丁标准品，加少量无水乙醇溶解，转移至50mL容量瓶中，加无水乙醇定容至刻度，摇匀

5.2.2硝酸铝溶液（100g/L）：称取Al(NO3)3·9(H2O)17.60g（精确至0.01g），加少量水溶解，转移至100mL容量瓶中，加水定容至刻度，摇匀

5.2.3醋酸钾溶液（98g/L）：称取C2H3KO29.80g（精确至0.01g），加少量水溶解，转移至100mL容量瓶中，加水定容至刻度，摇匀

6仪器和设备6.1紫外分光光度计

6.2高速破壁机

6.3分析天平，感量为0.0001g

6.4超声波提取器

6.5离心机，4000r/min

6.6组织捣碎机

7分析步骤7.1试样制备将刺梨鲜果（3.1）刺梨鲜果去皮、去籽，组织捣碎机打浆，混合均匀，备用；去除刺梨果干（3.2）和刺梨果脯（3.3）中可见杂质，用高速破壁机粉碎，将其制成粉状，备用；刺梨冻干粉（3.4）和刺梨喷干粉（3.5）研磨均匀备用

7.2试样提取7.2.1固态试样：取7.1样品0.5~2g，精密称定（精确到0.0001g），置烘干恒重具塞锥形瓶中，加无水乙醇50mL，称定重量，置于超声波提取器中超声处理1小时（每20分钟摇匀溶液一次），放冷，再称定重量，用无水乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，续滤液离心10分钟，取上清液，即得

7.2.2液态试样：刺梨原汁（3.6）、刺梨浓缩汁（3.7）等液体样品，精密量取样品1~10mL，置烘干恒重具塞锥形瓶中，加无水乙醇50mL，称定重量，置于超声波提取器中超声处理1小时（每20分钟摇匀溶液一次），放冷，再称定重量，用无水乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，续滤液离心10分钟，取上清，即得

7.3标准工作曲线准确量取芦丁对照品溶液（5.2.1）0.0mL、1.0mL、2.0mL、3.0mL、4.0mL、5.0mL分别置于50mL容量瓶中，依次加入硝酸铝溶液（5.2.2）1mL，醋酸钾溶液（5.2.3）1mL，摇匀后加水至刻度

静置1小时后，在420nm处测定吸光度

以50mL溶液中芦丁质量（mg）为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线

7.4空白试验与试样的测定平行进行，取相同量的所有试剂，采用相同的分析步骤，但不添加试样

7.5试样的测定准确量取提取液（7.2）1.0mL置于50mL容量瓶中，依次加入硝酸铝溶液（5.2.2）1mL，醋酸钾溶液（5.2.3）1mL，摇匀后加水至刻度

静置1小时后，在420nm处测定吸光度

若样品总黄酮含量较高（吸光度不在0.1~0.8之间），可适当稀释后再进行分析测定

8分析结果的表述8.1刺梨鲜果、刺梨干果等固态试样试样中总黄酮含量（以芦丁计）以百分含量（%）表示，按公式（1）进行计算

x=……………………（1）式中:x───试样中总黄酮含量（以芦丁计）；m───由标准曲线查出的样品中芦丁质量，单位为毫克（mg）；M───试样质量，单位为克（g）；d───样品稀释倍数；计算结果保留小数点后两位

8.2刺梨原汁、刺梨浓缩汁等液态试样样品中总黄酮含量（以芦丁计）以百分含量（%）表示，按式（2）计算：x=……………………（2）式中:x───试样中总黄酮含量（以芦丁计）；m───由标准曲线查出的样品中芦丁质量，单位为毫克（mg）；v───试样体积，单位为毫升（mL）；d───样品稀释倍数；计算结果保留小数点后两位

9精密度在重复条件下，获得的两次独立测定结果的绝对差值不超过算术平均值的10%

地方标准《槐米及其制品中总黄酮含量的测定 分光光度法》由安徽省浓香型白酒标准化技术委员会归口上报，主管部门为安徽省质量技术监督局。本标准规定了槐米及其制品中总黄酮含量的测定分光光度法。本标准适用于槐米、槐米提取液以及槐米发酵液等样品中总黄酮含量的测定。

地方标准《枸杞中总黄酮含量的测定-分光光度比色法》，主管部门为宁夏回族自治区质量技术监督局。

地方标准《枸杞中总黄酮含量的测定 高效液相色谱法》，主管部门为宁夏回族自治区质量技术监督局。

行业标准《柑桔类水果及制品中总黄酮含量的测定》，主管部门为农业农村部。本标准规定了柑橘类水果及制品中总黄酮含量的比色检测法。本标准适用于柑橘类水果及制品中总黄酮含量的测定。本标准总黄酮的定量测定范围：0.8mg/L～100mg/L.本标准总黄酮的定量限：0.8mg/kg。本标准总黄酮的检出限：0.3mg/kg。

行业标准《荞麦及其制品中总黄酮含量的测定》，主管部门为农业农村部。本标准规定了荞麦及其制品中总黄酮含量的分光光度测定法。本标准适用于荞麦及荞麦制品中总黄酮含量的测定，其最低检出限为0.5mg。

国家标准《蜂胶中总黄酮含量的测定方法 分光光度比色法》由442（中华全国供销合作总社）归口，主管部门为中华全国供销合作总社。

本标准规定了蜂胶中黄酮类化合物的总含量测定方法。 本标准适用于蜂胶，包括原始蜂胶、精制蜂胶及蜂胶的乙醇溶液。 本标准可用于测定黄酮类化合物的总含量在0.1%以上的蜂胶。