蜡样芽孢菌检测

检测信息（部分）

蜡样芽孢杆菌是一种需氧、产芽孢的革兰氏阳性杆菌，广泛分布于土壤、灰尘、水源及各类食品原料中。该菌株在适宜条件下可产生耐热性肠毒素和催吐毒素，是引发人类细菌性食物中毒的重要致病菌之一。蜡样芽孢杆菌检测服务主要面向食品生产企业、餐饮服务单位、进出口贸易商及监管部门，通过微生物培养、生化鉴定及分子生物学手段，对样品中的目标菌株进行定性定量分析，为食品安全风险评估及卫生质量控制提供数据支撑。

蜡样芽孢菌检测项目（部分）

• 菌落总数测定：反映样品中蜡样芽孢杆菌的污染程度及活菌数量。
• 定性检测：判定样品中是否检出蜡样芽孢杆菌，结果以检出或未检出表示。
• 定量检测（MPN法）：适用于低菌浓度样品，通过很大可能数法估算菌含量。
• 平板计数法：采用选择性培养基进行菌落计数，定量分析污染水平。
• 芽孢计数：经热处理后计数存活芽孢数量，评估耐热性污染风险。
• 溶血特性检测：观察菌落溶血环形态，辅助鉴别菌株致病性。
• 卵磷脂酶活性测定：检测菌株产生卵磷脂酶能力，用于种属鉴定。
• 溶血性肠毒素检测：采用免疫学方法检测腹泻型毒素Hbl复合体。
• 非溶血性肠毒素检测：检测Nhe毒素复合物，评估腹泻型中毒风险。
• 催吐毒素检测：采用液相色谱-质谱联用法测定呕吐毒素含量。
• 细胞毒性试验：通过细胞培养观察毒素引起的细胞病变效应。
• 生化鉴定：包括葡萄糖利用、硝酸盐还原、明胶液化等生化反应试验。
• VITEK鉴定：利用自动化微生物鉴定系统进行快速种属鉴定。
• PCR分子鉴定：针对特异性片段进行扩增，实现菌株精准鉴定。
• 毒力：检测ces、hbl、nhe等毒力相关携带情况。
• 药敏试验：采用纸片扩散法或微量肉汤稀释法测定菌株耐药谱。
• 蛋白质毒素晶体鉴定：区分蜡样芽孢杆菌与苏云金芽孢杆菌。
• 动力试验：观察菌株在半固体培养基中的运动能力。
• 淀粉水解试验：检测菌株淀粉酶活性，辅助种属鉴别。
• 甘露醇发酵试验：观察菌株在甘露醇培养基中的产酸反应。

检测范围（部分）

• 乳及乳制品：生鲜乳、巴氏杀菌乳、灭菌乳、发酵乳、乳粉、奶油等。
• 肉与肉制品：鲜冻畜禽肉、腌制肉、酱卤肉、熏烧烤肉、肉灌肠等。
• 米面制品：米饭、炒饭、米粉、河粉、年糕、速冻米面食品等。
• 淀粉及淀粉制品：食用淀粉、粉丝、粉条、淀粉糖、变性淀粉等。
• 豆制品：豆腐、腐竹、豆干、豆豉、纳豆、豆浆等。
• 调味品：酱油、食醋、酱类、复合调味料、香辛料等。
• 速冻食品：速冻水饺、馄饨、包子、汤圆、速冻肉丸等。
• 婴幼儿食品：婴幼儿配方食品、婴幼儿辅助食品、婴幼儿谷基食品等。
• 保健食品：片剂、胶囊、颗粒剂、口服液、发酵类保健食品等。
• 饮料：果蔬汁饮料、蛋白饮料、茶饮料、固体饮料、发酵饮料等。
• 糕点面包：烘烤糕点、油炸糕点、蒸煮糕点、月饼、面包等。
• 方便食品：方便面、方便米饭、冲调类方便食品等。
• 罐头食品：肉罐头、水产罐头、果蔬罐头、谷物罐头等。
• 水产品：鲜冻鱼类、虾蟹类、贝类、水产干制品、水产深加工品。
• 蛋及蛋制品：鲜蛋、皮蛋、咸蛋、蛋粉、液蛋制品等。
• 果蔬制品：鲜切果蔬、果蔬罐头、果酱、干制果蔬、腌制蔬菜。
• 食用油：食用植物油、食用动物油脂、食用调和油等。
• 糖果巧克力：硬糖、软糖、巧克力及巧克力制品、代可可脂巧克力等。
• 茶叶及相关制品：绿茶、红茶、乌龙茶、花茶、茶饮料等。
• 餐饮食品：集体配送餐、现制现售食品、餐饮具表面涂抹样等。

检测标准（部分）

序号	标准号	标准名称	类别	发布日期	CCS分类	ICS分类
1	GB/T 26427-2010	饲料中蜡样芽孢杆菌的检测	(CN-GB)国家标准	2011-01-14	B46畜禽饲料与添加剂	65.120饲料
2	DB51/T 2266-2016	蜡样芽孢杆菌防控板栗炭疽病技术规范	(CN-DB51)四川省地方标准	2016-09-26	B61种子、苗木、苗圃	65.020.40绿化和造林
3	SN/T 3932-2014	出口食品中蜡样芽孢杆菌快速检测方法 实时荧光定量PCR法	(CN-SN)行业标准-商品检验	2014-04-09	C53食品卫生	67.050食品试验和分析的一般方法
4	SC/T 7250.2-2025	鳖腮腺炎病诊断方法 第2部分：中华鳖致病性蜡样芽孢杆菌	(CN-SC)行业标准-水产	2025-12-09	B50水产、渔业综合	65.150捕捞和水产养殖
5	DB22/T 2692-2017	饲料中金黄色葡萄球菌和蜡样芽孢杆菌检测 双重微滴数字PCR法	(CN-DB22)吉林省地方标准	2017-09-30	B25饲料作物	65.120饲料
6	SN/T 2206.2-2009	化妆品微生物检验方法 第2部分：需氧芽孢杆菌和蜡样芽胞杆菌	(CN-SN)行业标准-商品检验	2009-02-20	Y42化妆品	71.100.35工业和家庭消毒用化学品
7	SN/T 5516.13-2023	出口食品中致病菌荧光重组酶介导链替换核酸扩增（RAA）检测方法 第13部分：蜡样芽孢杆菌	(CN-SN)行业标准-商品检验	2023-05-05	C53食品卫生	07.100.30食品微生物学
8	T/CASME 1796-2024	水产微生态制剂 蜡样芽孢杆菌	(CN-TUANTI)团体标准	2024-12-06	B农业、林业
9	T/QGCML 3888-2024	熟大米蜡样芽孢杆菌检验规范	(CN-TUANTI)团体标准	2024-03-15		07.100.30食品微生物学
10	SN 0176-1992	出口食品中蜡样芽孢杆菌检验方法	(CN-SN)行业标准-商品检验		X09卫生、安全、劳动保护
11	SN/T 3064.9-2011	国境口岸蝇类、蜚蠊携带重要病原体检测方法 第9部分:蜡样芽孢杆菌	(CN-SN)行业标准-商品检验	2011-09-09	C62卫生检疫	11.020医学科学和保健装置综合
12	ISO 7932:2004	Microbiology of food and animal feeding stuffs — Horizontal method for the enumeration of presumptive Bacillus cereus — Colony-count technique at 30 degrees C	(IX-ISO)国际标准化组织	2004-06-16		07.100.30食品微生物学
13	KS J ISO 7932-2007(2021)	미생물학－바실루스 세레우스 계수 일반지침－30 ℃ 집락계수법	(KR-KS)韩国标准	2007-11-23		07.100微生物学
14	DIN 10198-1:1999-09	Determining presumptive Bacillus cereus in milk by colony count at 37 C	(DE-DIN)德国标准化学会	1999-09-01
15	KS J ISO 7932	미생물학 바실루스 세레우스 계수 일반지침 30 집락계수법	(KR-KS)韩国标准	2022-12-30		07.100.30食品微生物学
16	KS J ISO 7932-2007(2012)	미생물학－바실루스 세레우스 계수 일반지침－30 ℃ 집락계수법	(KR-KS)韩国标准	2007-11-23		07.100微生物学
17	KS J ISO 7932-2022	미생물학 바실루스 세레우스 계수 일반지침 30 집락계수법	(KR-KS)韩国标准	2022-12-30		07.100.30食品微生物学
18	ISO 21871:2006	Microbiology of food and animal feeding stuffs — Horizontal method for the determination of low numbers of presumptive Bacillus cereus — Most probable number technique and detection method	(IX-ISO)国际标准化组织	2006-01-13		07.100.30食品微生物学
19	ГОСТ ISO 21871-2013	Микробиология пищевых продуктов и кормов для животных. Метод обнаружения и подсчета наиболее вероятного числа Bacillus cereus	(RU-GOST)俄罗斯国家标准	2013-06-07	B40/49畜牧	07.100.30食品微生物学
20	BS EN ISO 7932:2004+A1:2020	Microbiology of food and animal feeding stuffs. Horizontal method for the enumeration of presumptive Bacillus cereus. Colony-count technique at 30 °C	(GB-BSI)英国标准学会	2020-09-04

检测仪器（部分）

• 全自动微生物鉴定系统：实现菌株生化谱自动分析与种属鉴定。
• 实时荧光定量PCR仪：用于目标的快速扩增与定量分析。
• 高效液相色谱仪：分离检测催吐毒素等小分子代谢产物。
• 液相色谱-串联质谱联用仪：高灵敏度检测呕吐毒素含量。
• 酶标仪：用于ELISA法检测肠毒素的吸光度读数。
• 全自动菌落计数仪：平板菌落的快速识别、计数与统计分析。
• 生物安全柜：提供无菌操作环境，保障检测人员与样品安全。
• 恒温培养箱：提供菌株分离培养所需的恒定温度环境。
• 厌氧培养系统：为微需氧菌株培养创造适宜气体环境。
• 高压蒸汽灭菌器：培养基、器皿及废弃物的灭菌处理。
• 光学显微镜：观察菌株形态、染色特性及运动能力。
• 离心机：样品前处理过程中菌体收集与上清液分离。

检测方法（部分）

• GB 4789.14-2014 平板计数法：国家标准规定的蜡样芽孢杆菌定量检测方法。
• GB 4789.14-2014 MPN法：适用于菌含量较低样品的很大可能数定量检测。
• ISO 7932:2004 国际标准法：国际标准化组织发布的检测方法。
• ISO 21872-1:2017 方法：食品和动物饲料中潜在肠道致病菌检测方法。
• FDA BAM Chapter 14：美国食品药品管理局细菌学分析手册方法。
• 生化鉴定管法：采用传统生化反应管进行种属鉴定。
• VITEK 2 Compact鉴定法：利用自动化系统进行快速生化鉴定。
• 16S rRNA测序法：通过序列比对实现菌株精准鉴定。
• 实时荧光PCR法：针对特异性进行快速定性检测。
• ELISA酶联免疫法：检测食品中蜡样芽孢杆菌肠毒素。
• 乳胶凝集试验：快速检测菌株产生的特异性毒素。
• 细胞毒性中和试验：验证毒素活性及其细胞病变效应。

总结

蜡样芽孢杆菌检测是食品安全微生物监测的重要组成部分，对于防控细菌性食物中毒事件。通过规范化的采样、前处理、分离培养及鉴定流程，结合传统培养法与分子生物学技术，可准确评估食品及相关样品的卫生安全状况。检测机构应依据GB、ISO、FDA等标准方法开展检测工作，确保检测结果的准确性与可追溯性，为食品生产企业的质量管控及监管部门的执法监督提供技术依据。